Микроклональное размножение сортов жимолости синей куклина А. Г., Семерикова Е. А




Дата канвертавання22.04.2016
Памер46.37 Kb.


МИКРОКЛОНАЛЬНОЕ РАЗМНОЖЕНИЕ

СОРТОВ ЖИМОЛОСТИ СИНЕЙ
Куклина А.Г., Семерикова Е.А.

Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина РАН, Россия, Москва, (495) 977-90-55. E-mail: alla_gbsad@mail.ru


В Главном ботаническом саду им. Н.В. Цицина РАН в лаборатории биотехнологии размножения растений успешно изучается и внедряется в практику инновационный способ микроклонального размножения плодовых, ягодных и декоративных культур. Опыты по микроразмножению сортов жимолости (Lonicera caerulea L., Caprifoliaceae), начатые в 2000 г., показали перспективность такой технологии для данной культуры. Она обеспечивает хороший выход растений и открывает возможность получения оздоровленного посадочного материала [Куклина и др., 2003; Скворцов, Куклина, 2002].

Микроклональное размножение осуществляли на 10 сортах жимолости синей: Синичка, Московская 23, Фортуна, Гжелка, Нимфа, Амфора, Лебедушка, Камчадалка, Синяя Птица и Старт. В основу микроразмножения жимолости положена активация пазушных меристем, что сводит к минимуму риск появления самоклональных вариантов. Сбор одревесневших побегов с покоящимися почками проводили в ранневесенний период (март-апрель). В качестве первичных эксплантов использовали непосредственно конус нарастания (апекс) с листовыми примордиями и латеральные почки вегетирующих побегов. Для жимолости синей характерны почки смешанного строения, поэтому цветочные зачатки полностью удаляли.

Для выращивания и укоренения микрочеренков жимолости в условиях in vitro успешно применяли питательные среды MS [Murashige, Skoog, 1962] и WPM [Jones & al., 1976] с сахарозой, агар-агаром, физиологически активными веществами. На стадии размножения использовали 6-бензиламинопурин (БАП), при укоренении - индолилмасляную кислоту (0,8-1,5 мг/л ИМК). При культивировании эксплантов в течение 20-25 дней поддерживали температуру 18-25°С, 16-ти часовой фотопериод и освещенность 2500-4000 люкс. Субкультивирование регенерантов, в виде побегов с 1-2 междоузлиями на питательной среде, осуществляли каждые 3-4 недели.

При микроразмножении in vitro выявлено, что на среде WPM у сортов Фортуна, Камчадалка и Московская 23 коэффициент размножения (КР) увеличивается в два раза, по сравнению с культивированием их на среде MS. Для сортов Старт, Синичка, Синяя Птица и Нимфа минеральный состав питательных сред не оказал заметного влияния на КР (см. табл. 1).


Таблица №1

Развитие микрочеренков жимолости на WPM среде


Сорт

Высота побега на 20-ый день, см

Коэффициент

размножения



Фортуна

3,7

84

Камчадалка

3,8

80

Старт

2,8

54

Московская 23

4,0

45

Синяя Птица

3,4

25

Синичка

3,5

24

Амфора

2,8

24

Нимфа

3,8

22

При укоренении микрочеренков (высотой до 1,5 см) лучшие результаты были получены на питательной среде с 1/2 солей MS, при концентрации ИМК = 1 мг/л. Все сорта при таком содержании фитогормонов отлично укоренялись (96 -100 %). На первых этапах культивирования (до 20 дней) использование БАП в концентрации 0,8мг/л дает увеличение размеров побегов и КР (с 4 до 16). Чтобы получить КР до 22 через 1 месяц требовалось большее количество цитокинина (БАП=2,5 мг/л). Однако длительное культивирование in vitro при повышенном содержании цитокинина приводит к избыточному накоплению его в растении, появлению витрофицированных побегов и снижению темпов укоренения.

В ходе эксперимента при укоренении микрочеренков in vitro отмечена генетическая специфичность отдельных сортов жимолости синей. Развитие побега и корневой системы наиболее интенсивно проходило у сортов Московская 23 и Фортуна.

Особые условия адаптации требовались культиварам жимолости синей при подготовке их к нестерильным условиям (in vivo). Для этого растения пересаживали в стерильную смесь торфа с перлитом в соотношении 1:1, либо мох сфагнум. В течение двух недель поддерживали влажность воздуха 75-80% при помощи искусственного тумана. Затем растения-регенеранты, достигшие высоты 4,5-5,2 см, с развитой корневой системой пересаживали в ящики с субстратом, состоящим из торфа, листовой земли и песка (1:1:1). Через 4 месяца высота растений сортовой жимолости достигала 13-15 см.

При традиционных способах вегетативного размножения съедобных сортов жимолости (черенкование, отводки и др.) получается ограниченное количество посадочного материала, что препятствует распространению этой культуры. Преодолеть подобные трудности можно биотехнологическим методом размножения, увеличив выход оздоровленного потомства элитных сортов более, чем в тысячу раз, независимо от времени года.

Работа выполнена по Программе фундаментальных исследований ОБН РАН «Биологические ресурсы России: оценка состояния и фундаментальные основы мониторинга».


Литература:

  1. Куклина А.Г. Семерикова Е. А., Молканова О.И. Опыт клонального микроразмножения голубых жимолостей // Бюл. Гл. ботан. сада. Вып. 185. 2003. С. 160-167.

  2. Скворцов А.К., Куклина А.Г. Голубые жимолости. М.: Наука. 2002. 160 с.

  3. Murashige T., Skoog F. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures // Physiol. plant. 1962. Vol. 15, № 3. P. 473-497.

  4. Jones O.P., Yopgoot H.E., OFarrel D. Propagation in vitro of brut trees // Rep. Edest. Malling Res. Stn. 1976. P. 79.


Резюме на русском языке
МИКРОКЛОНАЛЬНОЕ РАЗМНОЖЕНИЕ

СОРТОВ ЖИМОЛОСТИ СИНЕЙ
Куклина А.Г., Семерикова Е.А.

Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина РАН, Россия, Москва, (495) 977-90-55. E-mail: alla_gbsad@mail.ru


Использование микроклонального размножения сортов Lonicera caerulea L. (Caprifoliaceae) способствует увеличению выхода укорененных растений более чем в тысячу раз в сравнении с зеленым черенкованием. Этот способ размножения позволяет получить сортовые растения свободные от бактериальных и вирусных болезней.
Резюме на английском языке
MICROCLONAL proPAGAtion OF

SORTS OF HONEYSUCKLE BLUE
Kuklina A.G., Semerikova E.A..
The Main Botanical Garden named after N.V. Tsitsin RAS, Russia,

Moscow, (495) 977-90-55. E-mail: alla_gbsad@mail.ru


The use of microclonal propagation with sorts of Lonicera caerulea L. (Caprifoliaceae) allows to multiply the number of rooted plants up more than thousand times as compared to green cutting. Through this method of propagation we obtain cultivars free from bacterial and virus infections.
.



База данных защищена авторским правом ©shkola.of.by 2016
звярнуцца да адміністрацыі

    Галоўная старонка